NK 細(xì)胞活化

1.  熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養(yǎng)備用。
2.  至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
3. 預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶，37°C，5% CO2培養(yǎng)。

注意：第六天之前，如果培養(yǎng)基變黃，細(xì)胞密度超過2.0 x 10⁶ cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿，保持細(xì)胞密度在在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之間。

NK細(xì)胞擴(kuò)增

1.  培養(yǎng)第六天，培養(yǎng)液離心，適量NK擴(kuò)增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細(xì)胞，再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細(xì)胞培養(yǎng)袋。
2. 每隔兩三天，根據(jù)細(xì)胞擴(kuò)增狀態(tài)，培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴(kuò)增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細(xì)胞密度在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之間。
3.  細(xì)胞總量到達(dá)2 x 10⁹ 后收獲細(xì)胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

注意：整個實驗過程中，細(xì)胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔，以避免細(xì)胞損傷，保持細(xì)胞活性。

Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝

英文名：Corning® NK Expansion Kit

中文名：Corning® NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)套裝

應(yīng)用：NK細(xì)胞活化擴(kuò)增

品牌產(chǎn)地：美國Corning

保存：2°C - 8°C

NK細(xì)胞是當(dāng)今免疫治療常用的細(xì)胞。但是NK細(xì)胞培養(yǎng)操作難度大，對培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術(shù)要求很高，難以獲得高純度能的活性細(xì)胞。 Corning NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)基套裝由多個組分組成，為 NK細(xì)胞培養(yǎng)提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細(xì)胞數(shù)量產(chǎn)量高，活性高，具有很高的殺傷效應(yīng)。

產(chǎn)品組成

NK細(xì)胞活化培養(yǎng)基

NK細(xì)胞活化添加劑

NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基

抗體預(yù)包被T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞培養(yǎng)袋

產(chǎn)品特色

擴(kuò)增能力強(qiáng)，在14天內(nèi)可達(dá)到100倍擴(kuò)增

效應(yīng)細(xì)胞比例高，可達(dá)80％

操作方便

產(chǎn)品訂購信息