国产精品扒开腿做爽爽的视频,无码丰满熟妇juliaann与黑人,无码av天天av天天爽,成在人线无码AⅤ免费视频

服務(wù)熱線

15021010459
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > 細胞適應(yīng)干細胞無血清培養(yǎng)基的方法

細胞適應(yīng)干細胞無血清培養(yǎng)基的方法

更新時間:2019-01-16 點擊次數(shù):1323
眾所皆知干細胞無血清培養(yǎng)基的基本配方:基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。 用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細胞在體外培養(yǎng)時,多數(shù)呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當(dāng)其在無血清、無蛋白培養(yǎng)基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。
1.直接適應(yīng)——細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到干細胞無血清培養(yǎng)基(SFM)中。
一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)干細胞無血清培養(yǎng)基。對于直接適應(yīng),接種細胞密度應(yīng)該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,傳代培養(yǎng)細胞。當(dāng)細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,細胞*適應(yīng)了干細胞無血清培養(yǎng)基。每隔3~5天,當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應(yīng)了干細胞無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
2.連續(xù)適應(yīng)——分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到干細胞無血清培養(yǎng)基(SFM)中,與直接適應(yīng)相比較,連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩毎訙睾鸵恍?/div>
(1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基:25%SFM 混合培養(yǎng)基中,傳代培養(yǎng)。
(2)當(dāng)細胞密度>5×10細胞/ml時,以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,在有血清培養(yǎng)基:SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
(3)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,25%有血清培養(yǎng)基和75% SFM中傳代培養(yǎng)。
(4)當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),在100%SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
(5)每隔3到5天,當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應(yīng)了干細胞無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
建議備份前一次混合培養(yǎng)的培養(yǎng)物,直到每一次細胞適應(yīng)了新的混合培養(yǎng)基。每一次減少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培養(yǎng)基中進行幾次傳代。
在適應(yīng)過程中,不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意,與有血清培養(yǎng)基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白質(zhì),因而更易于受外界因素的影響。
細胞培養(yǎng)適應(yīng)替代血清:許多細胞利用連續(xù)適應(yīng)方法能很好的適應(yīng),用包含F(xiàn)BS的的培養(yǎng)基和包含有替代血清的培養(yǎng)基1∶1(v∶v)的混合培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞。通過下列的混合培養(yǎng)基的方式,連續(xù)幾代減少當(dāng)前培養(yǎng)基的量:1∶2,1∶4,1∶16和100%替代培養(yǎng)基。每次適應(yīng)改變血清比例時,傳代細胞2到3次。
培養(yǎng)可以直接從FBS轉(zhuǎn)換到替代血清。一開始就使用相同于FBS的濃度的替代物或血清,生長的延遲可能會發(fā)生,4允許進行2到3次的傳代,使生長率恢復(fù)到以前的水平。
特別需要強調(diào)的是:配制無血清培養(yǎng)液必須使用高質(zhì)量的水,如石英玻璃蒸餾器經(jīng)三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為干細胞無血清培養(yǎng)基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子,既便水中的有毒物質(zhì)含量甚微,也可能對細胞產(chǎn)生致死性損害。這是無血清培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一。

2025 版權(quán)所有 © 重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司主要經(jīng)營干細胞研究 干細胞治療產(chǎn)品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發(fā)等產(chǎn)品。

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

400-021-2200

掃一掃,關(guān)注我們

99久久久无码国产精品9| 久久躁狠狠躁夜夜av| 国产猛男猛女超爽免费视频| 撸啊撸视频在线观看| 国产乱人伦真实精品视频| 最近的2019中文字幕国语在线| 免费无码AV片在线观看潮喷| 日韩人妻无码精品一区二区三区| 欧美猛男军人gay巨大| 在线视频免费观看www动漫| 99久久国产福利自产拍| 乱公和我做爽死我视频免费| 中文字幕av一区二区三区 | 色国产精品一区在线观看| 日本添下边视频全过程| 国产成人啪一区二区免费| 免费无码一区二区三区蜜桃大| 国产人妖XXXX做受视频| 精品人妻中文无码av在线| 久久精品AⅤ无码中文字字幕蜜桃| 国产乱子伦农村叉叉叉| 青青草视频在线观看| 色综合AV综合无码综合网站| 两个人看的www视频免费完整版 | 亚洲午夜无码av毛片久久| 女人露p毛视频·www| 人妻少妇一区二区三区| 亚洲成a人片在线观看中文| 一本大道伊人av久久综合| 国产日产欧产精品| 久久久久久久久毛片精品| 国产精品99久久免费观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 精品人妻无码一区二区三区手机版 | 中字幕一区二区三区乱码| 大陆国语对白国产av片| 亚洲熟女www一区二区三区| 亚洲综合无码一区二区| 肉浦团在线观看| CAOPORN免费视频国产| 久久天天躁狠狠躁夜夜免费观看|